生物制品表征FAQ汇总

• • 如何清洗MALDI基质？

  可以在一个装有50%甲醇和大约5%醋酸的大烧杯中超声10分钟。相关服务:MALDI TOF分子量分析

• • HCP——如果我无法获得模拟细胞系，或者我的培养条件需要存在大量血清，那么确定覆盖率的最佳方法是什么？

  这是一个具有挑战性的情况。您可以使用以下几种方法，每种方法都有缺点需要考虑。 1、使用HCP亲和柱从样品中捕获HCP，然后通过2D凝胶电泳分离以进行DIGE分析。这种方法可以让您看到检测到的蛋白质的数量，但是总蛋白质样品中的血清可能会导致2D凝胶上的HCP难以全部捕捉到，因为血清会掩盖它们或

• • HCP——置信水平 (CV%) 在覆盖率实验中指的是什么？

  置信水平(CV%)是根据一式三份覆盖率实验的平均覆盖率计算得出的。以这种方式测量覆盖置信水平很重要，因为覆盖分析可能会在重复之间引入细微的变化。相关服务:宿主蛋白残留(HCP)分析服务

• • HCP——如果纯化策略的一部分要求酶切，那么如何使用模拟/未处理的样品来确定覆盖率？

  由于ELISA使用多克隆抗体来检测尽可能多的HCP，因此仍然有很大的机会检测到被酶切割的HCP。确定酶切效果的一个好的对照实验是对(1)总 HCP 和(2)酶处理的 HCP 进行两次 HCP 覆盖测定。DIGE也可能是用于确定酶裂解后HCP 2D模式的变化的有用工具。相关服务:宿主蛋白残留(

• • HCP——与银染相比，cydye 标记的效果如何？

  Cydye标记是一种广为人知和可重复使用的标记方法。它被证明至少和银染一样敏感，并且作为一种替代标记方法已经使用了二十多年。相关服务:宿主蛋白残留(HCP)分析服务

• • HCP——什么是 HCPs? 为什么需要从产品中去除它们？

  HCP代表宿主细胞蛋白。HCPs是由宿主细胞(例如大肠杆菌和 CHO)产生的与药物物质或产品无关的其他蛋白。从药物物质中清除 HCP 被认为是一个关键的质量属性，因为在最终药物中存在 HCP 可能会对患者造成不良影响，并影响产品本身的功效。相关服务:宿主蛋白残留(HCP)分析服务

• • HCP——HCP终浓度的良好目标水平是多少？低于50PPM是一个不错的浓度水平吗？

  该领域普遍认为50ppm是一个很好的浓度标准。HCP的水平取决于许多因素：给药方法、给药频率和剂量、药物种类（单克隆Ab或其他重组蛋白）、宿主细胞、来自类似分子的历史数据（如果有的话）以及临床试验结果等。相关服务:宿主蛋白残留(HCP)分析服务

• • HCP——是应对所有制造批次进行 HCP检测，还是仅对性能过程认证（PPQ）批次进行？

  这取决于开发阶段。在早期PD阶段，需要检查每个纯化步骤中的所有HCP水平以优化纯化方法。一旦生产过程完成，就没有必要在所有纯化步骤中检测HCP。然而，HCP在最终物质中的存在情况是质量关键属性，最好是对每个生产批次的产品进行质量检测，以最大限度地降低对患者安全的风险。相关服务:宿主蛋白残留(

• • HCP——质谱法可以取代HCP酶联免疫吸附测定和覆盖率测定吗？

  质谱法是一种极好的正交方法，但它还不够强大，无法取代ELISA。造成这种情况的主要原因是： 1、敏感性。虽然质谱分析非常敏感，但大量的药物物质使得对HCP的相对敏感性在10 ppm的范围内，比ELISA（<1 ppm）的敏感度低10倍左右。 2、速度。ELISA结果可以在大约四个小时内获得和

• • 何时选择肽图谱分析或完整质量分析？

  最合适方法的选择取决于所涉及的不同修饰的复杂性。通过变性或还原生成亚基提高了分析结果的质量。如果同时观察到许多修饰，则质量分辨率会限制完整质量应用。例如涉及多个糖基化位点，则包含糖肽分析的肽图谱是首选。与我们联系，我们将一起为您的产品找到最合适的方法。相关服务:生物药物分析