疏水相互作用色谱HIC——如果已经在缓冲液中运行了从高盐到无盐的梯度，但仍然有尚未洗脱的蛋白质时该怎么处理？

当感兴趣蛋白在用洗脱缓冲液洗涤后仍然粘附在柱子上时，可以使用低浓度的乙醇甚至乙腈。低浓度尿素或盐酸胍也可用于使蛋白质变性并使其从色谱柱中洗脱。此外，也可以使用苛性钠剥离色谱柱以去除不需要的污染物。疏水性较低的 HIC相则不需要对系统使用后梯度改性剂。

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