尺寸排除色谱(SEC)的原理?
流动相中的分子可能呈现3种构型: 线性构型,例如 PEG; 分支构型,例如葡聚糖; 球状构型,例如蛋白质。因此,给定的分子在溶液中将有一个独特的流体动力学半径。正是由于分子尺寸的差异,才能够通过尺寸排阻液相色谱分离混合物中的化合物。而大分子物质将不能或有限的进入SEC柱子的凝胶孔内,较小的分子则适合孔径并进入孔内。因此,这些分子将以相反的分子量顺序从柱中洗脱出来。未保留的化合物将从柱的空隙体积中洗脱出。一个完全保留的分子将在柱的总体积中进行洗脱,即空隙体积和孔容积的总和。
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