请问waters-TQS的mrm模式操作步骤是怎样的？
- 柱温：通常30-50°C。
- 流速：根据液相梯度设定（如0.3 mL/min）。
- 脱溶剂气流速：800-1000 L/h（氮气）。
- 锥孔气流速：50-150 L/h。
- 脱溶剂温度：500-600°C（根据挥发性调整）。
- 母离子（Precursor） → 子离子（Product）；
- 碰撞能量（CE, Collision Energy） → 需预实验优化；
- 驻留时间（Dwell Time）→ 建议≥20 ms（避免信号丢失）。
- A相：含0.1%甲酸的水；
- B相：含0.1%甲酸的乙腈；
- 梯度程序（根据分离需求设定，如5-95% B，10分钟）。
Waters Xevo TQS (Triple Quadrupole Mass Spectrometer) 在 MRM (Multiple Reaction Monitoring) 模式下的操作步骤如下：
一、仪器与软件准备
1、开机与软件启动
（1）开启质谱仪（TQ-S）和液相系统（如UHPLC），预热30分钟。
（2）打开MassLynx 4.2 或更高版本软件，选择MS Tune和MS Acquisition模块。
2、质谱调谐与校准（初次使用或定期维护时）
（1）在MS Tune中选择Auto Tune，使用标准调谐液（如NaCsI或PEG）优化质谱参数（离子源温度、锥孔电压等）。
（2）确认调谐报告中的质量精度（±0.1 Da）和灵敏度（信噪比>100）。
二、创建MRM分析方法
1、新建方法文件
（1）在MS Acquisition界面，点击 File > New > Method，输入方法名称（如MRM_Quantitation）。
（2）选择色谱柱参数（与液相方法一致）
2、设置质谱参数
（1）离子源模式：ESI（电喷雾）或APCI（大气压化学电离），根据待测物性质选择（极性、分子量）。
（2）极性：正离子（+ve）或负离子（-ve）。
（3）脱溶剂气和锥孔气参数：
3、MRM通道设置
（1）在MS Method页面，点击 MRM 选项卡。
（2）手动添加或导入MRM表：
4、碰撞能量优化（如有需要）
在IntelliStart模块中运行自动CE优化或手动注入标准品进行参数扫描。
三、液相方法联用设置
1、联用液相参数
（1）流动相程序（LC Method）
（2）进样体积：1-5 μL（视浓度而定）。
2、同步触发信号
在MS Acquisition中勾选 Use LC Contact Closure，确保质谱与液相时间同步。
四、数据采集与保存
1、样品序列编辑
（1）创建Sample List，输入样品名称、路径、方法文件。
（2）设定空白（Blank）、QC（质控）和实际样本的运行顺序。
2、实时监控
（1）点击 Start，在Real Time Plot中观察MRM通道的信号强度。
（2）确认基线稳定（噪音<100计数）和保留时间一致性（偏差<0.1分钟）。
五、数据分析（以TargetLynx为例）
1、数据导入
打开TargetLynx XS，导入原始数据文件（.raw）和方法文件（.mth）。
2、峰积分与定量
（1）设定积分参数（基线窗口、峰宽阈值）。
（2）通过内标法或外标法生成校准曲线（R² ≥0.99）。
3、报告导出
导出浓度表（Excel或PDF），标注信噪比（S/N）和RSD（应<15%）。
六、注意事项
1、系统稳定性
（1）每运行10个样本后插入QC样品，监控保留时间和响应值漂移。
（2）定期清洗离子源（建议每50次进样后用异丙醇/水（50:50）冲洗）。
2、污染预防
（1）避免高浓度样本直接进入质谱，可设置洗针程序或稀释进样。
（2）使用在线过滤器（0.2 μm）保护质谱入口。
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