请问DeNovo only peptides和DB peptides两个表有什么区别啊?
在蛋白质组学的质谱数据分析中,DeNovo only peptides和DB peptides是两类不同的肽段鉴定结果,核心区别体现在以下三点:
一、鉴定方法
1、DB peptides(Database peptides)
依赖已知的蛋白质数据库进行匹配(如UniProt/Swiss-Prot),通过比对实验质谱峰与数据库中理论谱峰的相似性完成鉴定。这类肽段属于“已知序列”,直接指向数据库中已有记录的蛋白质。
2、DeNovo only peptides
完全基于De novo测序技术,直接从质谱数据推导肽段序列,无需依赖任何数据库。这些肽段可能来源于以下情况:
(1)未被收录的新颖序列(如新基因产物、突变或可变剪接形式);
(2)数据库搜索参数(如修饰、酶切特异性)设置不匹配导致漏检;
(3)质谱质量不足或信噪比低,导致数据库搜索算法无法可靠匹配。
二、数据库依赖性
1、DB peptides
存在“数据库偏好性”,仅能发现数据库内已注释的序列,对未知或非经典修饰(如稀有翻译后修饰)的灵敏度低。
2、DeNovo only peptides
绕过数据库限制,可揭示传统方法遗漏的序列,尤其适用于非模式生物、突变检测或新蛋白发现场景。但其可靠性依赖于De novo算法性能(如PEAKS、Novor)及质谱数据质量(高分辨率MS/MS数据更优)。
三、后续验证需求
1、DB peptides
通常经过统计学验证(如FDR控制),可靠性较高,可直接用于定量或功能分析。
2、DeNovo only peptides
需要额外验证(如合成肽段重检、靶向PRM/MRM验证),以排除De novo算法可能产生的序列误判(例如同分异构体混淆或低质量谱图推断错误)。
四、实际应用中的意义
1、DeNovo only peptides表常用于:
(1)发现新蛋白质或突变体;
(2)辅助修补基因组/转录组注释的漏洞;
(3)优化数据库以提升后续搜库效率。
2、DB peptides表则用于:
(1)常规蛋白质定性/定量分析;
(2)基于已知功能的通路富集或互作网络构建。
五、补充注意事项
部分分析流程会将两类结果整合(如“Hybrid approach”:De novo结果补充到数据库中再搜库),以平衡灵敏度和假阳性率。若工具链允许,建议交叉验证(如De novo结果与数据库搜索的“开放修饰”模式联用)以提高覆盖度。
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