请问SILAC稳定同位素标记可以在普通实验室进行吗?
SILAC(稳定同位素标记细胞培养)在普通实验室可行,但有一定限制。
1、细胞培养:可在普通细胞培养实验室进行,使用无血清或特定SILAC培养基,加入同位素标记氨基酸(如Lys-8、Arg-10)。
2、设备要求:细胞培养箱、离心机、裂解和蛋白提取设备等;质谱检测(LC-MS/MS)通常需要送至专业平台完成。
3、耗材与成本:同位素标记的氨基酸较昂贵,并且要严格避免非标记氨基酸污染,实验预算需充分考虑。
4、时间要求:细胞需传代3-5代,确保同位素标记完全替代天然氨基酸。
结论:普通实验室可完成细胞培养、蛋白提取、样品制备,但质谱分析需外包至专业平台。
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