目的蛋白是正常状况下是四聚体形式,这个方法处理WB能做出来吗?
如果你的目标蛋白在正常情况下是四聚体形式,使用交联法处理样本后进行Western Blot(WB)分析是完全可行的,且实际上交联法能够帮助你检测和稳定四聚体等高阶结构。交联法在WB实验中用于固定蛋白质的多聚体或复合物结构,防止它们在样品制备过程中解聚,从而帮助你准确检测蛋白质的聚合状态。
关键注意事项:
1、不使用还原剂:避免使用还原剂(如DTT),以防止蛋白质解聚,保持四聚体的完整性。
2、选择合适的交联剂和浓度:交联剂的选择和浓度需要优化,过高的交联剂浓度可能会导致非特异性交联。
3、分子量迁移:交联后的四聚体蛋白会显示出比单体较大的分子量,并迁移得较慢。
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