过表达的co-ip细胞样品，收了之后可以冻-80，之后做么？
过表达的Co-IP（共免疫沉淀）实验样品在细胞收集后是否可以冷冻保存（-80℃）取决于实验的具体要求和样品的性质。以下是关键要点：
一、可行性分析
1、蛋白质稳定性
（1）蛋白质通常可以在-80℃下长期保存，尤其是蛋白裂解液中含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂时。
（2）冻存对蛋白复合物的影响可能因复合物的稳定性而异，某些复合物可能在冷冻/解冻过程中解离。
2、Co-IP的目标
（1）如果目的是检测过表达的目标蛋白之间的相互作用，冷冻保存可能会引入一定风险（复合物解离或构象变化）。
（2）若目标是单个蛋白的检测（如Western blot验证），冻存样品通常不会有明显问题。
3、裂解液选择的重要性
（1）若已在裂解液中裂解细胞，确保裂解液中含有足够的蛋白酶和磷酸酶抑制剂，且裂解液适用于冷冻保存。
（2）如果细胞尚未裂解，冷冻保存后再裂解可能影响某些蛋白的提取效率。
二、实验建议
1、优先选择新鲜样品进行Co-IP：
（1）新鲜样品可以最大限度保留蛋白复合物的完整性。
（2）如果条件允许，尽量避免冻存后再进行Co-IP。
2、冷冻保存的条件
（1）裂解后保存
确保裂解液中加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。
将裂解液快速分装并立即-80℃冻存，避免反复冻融。
（2）裂解前保存
将收集的细胞颗粒快速冷冻于-80℃，避免冻融次数过多。
在解冻后立即加入裂解液并进行后续步骤。
3、实验优化
（1）若必须冻存样品，建议进行小范围的预实验，测试目标蛋白的表达和相互作用是否受冷冻影响。
（2）同时设置新鲜样品对照，以评估冷冻保存对结果的影响。
4、保存时间
冻存时间尽量缩短，建议在冻存后尽快处理，以减少蛋白复合物的潜在解离。
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