WB实验什么时候煮蛋白?
"煮蛋白"(或称为“沸腾样品”)是指将蛋白样品在高温下加热一段时间,以实现蛋白质的变性,这通常涉及到将含有蛋白质的样品与一个含有SDS和减少剂(如β-mercaptoethanol或DTT)的加载缓冲液混合,并在沸水浴中加热5-10分钟。
一般在SDS-PAGE凝胶电泳之前,样品提取完成并与加载缓冲液混合均匀后,就可以进行加热变性。加热变性后,样品可以立即用于SDS-PAGE,然后进行Western Blot。
需要注意的是,某些敏感或容易降解的蛋白质可能不需要长时间的加热,或者可以在稍低的温度下加热。但对于大多数蛋白质,常规的沸腾处理是有效和必要的。
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