蛋白质测序Edman
Edman降解法是瑞典化学家于1967年发明的一种测序方法,用于蛋白质或多肽N末端序列分析,基于Edman降解法的测序仪也是第一台蛋白质测序仪。
Edman降解法进行蛋白质或多肽N末端序列分析是一个循环式的化学反应过程,主要包括3个主要步骤:第一步就是发生偶联反应,利用异硫氰酸苯酯(PITC)与蛋白质多肽的N末端氨基酸残基结合形成苯氨基硫甲酰(PTC)衍生物,即PTC-肽。然后在三氟乙酸的作用下进行环化裂解,利用三氟乙酸处理PTC-肽,使N末端氨基酸被选择性的切断,释放出该氨基酸残基的噻唑啉酮苯胺(ATZ)衍生物。最后利用该ATZ-衍生物的有机溶液从反应液中萃取出来,ATZ-衍生物不稳定,需通过酸化处理将其转化为稳定的苯乙内酰硫脲(PTH)衍生物,即PTH氨基酸,然后对该氨基酸进行鉴定。这一系列反应如此循环,每次循环鉴定一个切下的末端氨基酸,直到完成N末端氨基端的序列测定。
百泰派克生物科技提供基于Edman法的蛋白质N末端测序一站式科研技术服务,用于蛋白或活性多肽N端序列分析,还可用于确认重组蛋白表达情况,如是否完整表达、表达过程是否发生断裂以及N端序列是否发生修饰等。百泰派克生物科技还可根据需求提供定制化技术服务,欢迎免费咨询。
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