蛋白磷酸化质谱检测
蛋白磷酸化质谱检测可以检测蛋白磷酸化类型和位点等情况,可以用于磷酸化定量蛋白组学的研究。百泰派克生物科技提供磷酸化定量蛋白组学研究的服务。
蛋白磷酸化质谱检测
顾名思义,蛋白磷酸化质谱检测就是利用质谱技术检测蛋白质的磷酸化。质谱分析蛋白磷酸化包括:识别磷酸化多肽的存在,根据氨基酸序列确定磷酸化类型,确定磷酸化的位点,以及对磷酸化蛋白进行定量。由于磷酸化修饰的蛋白质在生物样本中含量低、动态范围广,磷酸化肽段的信号容易被非磷酸化肽段的信号抑制,所以在利用质谱技术分析样品之前,需要先对磷酸化修饰的蛋白和肽段进行富集从而提高修饰蛋白的丰度。常用的富集磷酸化蛋白和肽的方法包括有固定金属亲和色谱以及高亲和抗体免疫沉淀等。
蛋白磷酸化质谱检测
蛋白磷酸化质谱检测原理
质谱检测蛋白质,首先是将蛋白质酶解后的肽段离子化,因质荷比不同,肽段在分析器中分离,通过测量分离肽段离子的相关参数,再用软件分析即可实现蛋白质的检测鉴定。磷酸化的蛋白肽段一般不稳定,在质谱中会因自发亚稳态分解或者碰撞诱导裂解,在用磷酸酯酶处理后,磷酸化肽段易丢失一个HPO3或H3PO4分子,利用这些特征即可对磷酸化肽段进行鉴定。
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