磷酸化位点质谱分析
质谱分析在磷酸化分析中起着重要作用,可用于磷酸化蛋白质的位点鉴定和定量分析等。百泰派克生物科技提供蛋白磷酸化位点质谱检测服务。
磷酸化和磷酸化位点
磷酸化是细胞信号通路中重要的共价翻译后修饰(PTM)。该修饰是可逆的,并且由蛋白激酶催化。研究表明,超过30%的真核蛋白质会发生磷酸化。磷酸化修饰主要对靶蛋白具有两种调节机制:(1)磷酸化可能会导致修饰的蛋白质(例如酶和受体)的结构发生构象变化,从而“开启”或“关闭”其功能;(2)磷酸化改变了蛋白质与其效应子的亲和力,使磷酸化的蛋白质可以募集或释放其下游效应子。磷酸化修饰可以调节广泛的生物学活性,例如细胞生长、细胞代谢、细胞分裂等等。
在真核生物中,磷酸化可能发生在丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和组氨酸等残基上。鉴定特定目标蛋白质的磷酸化位点以及蛋白质组中更广泛的磷酸化位点对于全面研究蛋白质磷酸化的功能作用和分析信号网络很重要。

磷酸化位点质谱分析
磷酸化位点的质谱检测
质谱是用于鉴定蛋白质磷酸化位点的技术之一,常与液相色谱联用。在基于质谱的磷酸化位点检测中,蛋白质样品先由蛋白酶消化成肽段。由于与未修饰的肽相比,磷酸化的肽的化学计量水平低,因此需要对磷酸化的肽进行富集后再进行液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析。串联质谱会测量完整的肽质量和碎片离子质量,利用生物信息学分析通过将这些实验数据与从序列数据库得出的理论光谱进行匹配来实现磷酸化位点分析。
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