脂质代谢组学研究中怎么提取细胞内的脂质

提取细胞内的脂质过程通常包括以下步骤：




1.细胞采集：

将培养的细胞通过洗涤和离心收集起来。




2.细胞裂解：

使用裂解缓冲液（如含有去垢剂的盐溶液）破坏细胞膜，释放细胞内容物。这一步骤确保了脂质的释放。




3.脂质提取：

最常用的方法是所谓的Bligh和Dyer方法或Folch方法。这些方法通常涉及到有机溶剂（如氯仿、甲醇和水）的使用。

• Folch 方法：向裂解的样品中加入氯仿和甲醇（比例为 2:1）。充分震荡混合，确保脂质被有效提取。
• Bligh 和 Dyer 方法：向样品中加入甲醇、氯仿和水（比例为 2:2:1.8）。充分震荡混合。



4.离心分离：

经过适当的摇动和混合后，样品被离心以分离成两层，上层是水相（含有非脂质成分），下层是氯仿相（含有脂质）。




5.脂质收集：

小心地收集下层，这里包含了提取的脂质。




6.溶剂蒸发：

使用氮气吹干或真空离心蒸发器去除溶剂，可以得到纯净的脂质样品。




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