质谱法可以对蛋白进行定量检测吗
是的,质谱法(Mass Spectrometry, 简称 MS)可以用于蛋白质的定量分析。蛋白定量质谱就是利用质谱技术进行蛋白质含量分析,其基于所检测到的肽段离子的质谱峰强度结合理论数据库以及生物信息学分析方法来计算蛋白质的含量。根据质谱数据采集方式可以将蛋白质定量方法分为DDA策略和DIA策略,DDA策略采用数据依赖型扫描模式对质谱数据进行采集,尽可能多的收集全部母离子的碎片信息,是一种非靶向定量技术,Label Free、SILAC、TMT以及iTRAQ等技术就是典型的基于DDA模式的蛋白质定量技术。DIA策略采用数据非依赖型扫描模式对质谱数据进行采集,是一种靶向定量蛋白质技术,该方法对质谱仪的分辨率等性能要求更高,定量结果也更准确,SWATH定量技术就是典型的DIA蛋白质定量技术。这种技术能够测量特定蛋白质或肽段的相对或绝对含量。质谱法在蛋白质组学中非常重要,因为它提供了一种精确且灵敏的方法来鉴定和定量蛋白质。它通过测量蛋白质或其肽段的质量来鉴定和定量蛋白质。
蛋白定量质谱主要分为相对定量和绝对定量两种方式:
1、相对定量:
比较不同样本中蛋白质的相对丰度。常用的技术包括同位素标记(如 SILAC,iTRAQ,TMT)和标记自由方法(如标记自由定量,SWATH)。
2、绝对定量:
确定蛋白质或肽段的确切摩尔浓度。常用的技术包括使用内部标准的多重反应监测(MRM)或绝对量化(AQUA)策略。
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