质谱法N端序列分析

    质谱法N端序列分析是一种利用质谱技术高效、准确地测定蛋白质/多肽N端的氨基酸序列的方法。由于其高灵敏度、高分辨率和高通量的优点,可用于分析复杂的蛋白质/多肽混合物,以及鉴定修饰、突变以及其他序列变异。与传统的Edman降解法相比,质谱法具有更高的通量和灵敏度,能够分析更复杂的样品和较大的蛋白质。

     

    基于高分辨质谱法的N端测序,样品经过SDS-PAGE分离目标蛋白后使用蛋白酶酶解,酶解后的产物用Q-Exactive系列质谱仪(Thermo Fisher Scientific)进行质谱分析,肽段在质谱中碎裂得到b、y离子的二级质谱图,通过图谱与蛋白理论氨基酸序列比对确定蛋白质的N端位置。百泰派克生物科技BTP结合高效液相色谱仪和高分辨质谱,基于N端测序原理,建立了基于质谱法的N端序列分析平台,百泰派克生物科技通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证;为您提供高质量的质谱法N端序列分析服务,我们采用两种不同的蛋白酶切方式,产生两个长度不同的N端肽段,相互验证最终确定蛋白N端序列。欢迎免费咨询,了解更多详情!

     

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    质谱法N端序列分析两种酶切方式对比

     

    实验仪器

     

    • 高效液相色谱串联质谱仪:高效液相色谱仪-Easy-nLC 1200
    • 电喷雾-组合型离子阱Orbitrap 质谱仪-Q Exactive™ Hybrid

     

    Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer

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    技术优势

     

    • 基于高分辨质谱法的N端测序,可以通过高分辨率质谱分析N端封闭和翻译后修饰(PTMs),从而确定蛋白质N端起点;
    • 对于复杂的蛋白,我司支持对复杂蛋白进行N端二甲基化标记,通过分析标记位置确定复杂蛋白样品中的多个蛋白的N端起点。

     

    案例示意

     

    蛋白药物样品的N端氨基酸序列分析:

    Trypsin酶解后的样品经过LC-MS/MS分析后得到质谱数据,质谱数据经过与理论数据库匹配,得到和理论N端序列(HYAHVDCPGHADYVK)相符合的MS2图谱,图谱如下:

     

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    N端序列二级质谱图

     

    通过以上分析可以得出此蛋白药物的N端起始氨基酸为组氨酸,N端序列为HYAHVDCPGHADYVK。

     

    中/英文项目报告

     

    在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:

    1. 实验步骤(中英文)
    2. 相关的质谱参数(中英文)
    3. 质谱法N端序列分析详细信息
    4. 质谱图片
    5. 原始数据

     

    质谱法N端序列分析一站式服务

     

    您只需下单-寄送样品
    百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告

     

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