10X单细胞测序是不是只测3'UTR的那部分?
10X单细胞测序技术基于GEM(Gel Bead in EMulsion)技术,将单个细胞与一系列的微滴中的琼脂糖珠(gel bead)一起封装在油水混合物中。每个琼脂糖珠上都有一种特定的条形码,用于标记来自同一细胞的RNA分子。细胞在微滴中被裂解,RNA与琼脂糖珠上的条形码进行反应,形成RNA-条形码复合物。复合物经过逆转录和扩增,生成cDNA,然后进行测序。
10X单细胞测序技术主要关注的是mRNA的转录本,而不是特定的区域,如3'UTR。在cDNA合成过程中,使用的是一种称为oligo-dT的引物,它可以选择性地逆转录mRNA的poly(A)尾部。因此,10X单细胞测序可以捕获到mRNA的全长,包括5'端、CDS(Coding Sequence)和3'端。
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