HCP定量质谱

当前已开发出多种互补的分析用于监测宿主细胞蛋白（HCP），包括1D/2D-PAGE、基于质谱（MS）的分析技术等。如通过二维液质联用（2D-LC-MS）识别潜在的残留HCP，可以开发出基于目标的多反应监测（MRM）-LC-MS的方法来量化原液中的多个HCP。

DDA蛋白质组学：采用数据依赖性采集模式（Data Dependent Acquisition，DDA）进行较高浓度的HCP检测，可以鉴定到上千个蛋白，建立数据库，同时可以得到HCP特异性肽段的离子对信息；在下游纯化阶段对较低浓度的HCP采用数据非依赖性SWATH的采集模式，可以获得低浓度HCP的定量信息，同时还可以根据HCP的特异性肽段的离子对信息，追踪特异性HCP在不同纯化阶段的浓度变化情况。

PRM蛋白质组学：平行反应监测技术（Parallel Reaction Monitoring，PRM）是一种基于高分辨、高精度质谱的靶向蛋白质组学技术，能够对目标蛋白质和目标肽段进行选择性检测，从而实现对目标蛋白质/肽段进行绝对定量。将直接消化的目的蛋白样品注入质谱仪耦联的终极液相色谱仪系统，以C18柱分离消化的肽。

然而，基于MS的方法应用中的最大挑战在于，通常HCP浓度较目的蛋白低6个及以上的数量级，而质谱仪本身缺乏从高浓度目的蛋白中鉴定和检测低浓度HCP的能力。为了克服低ppm水平HCP和高浓度治疗性蛋白之间存在较大动态浓度范围的问题，一般可采用两种策略：一种策略为在质谱分析之前增加2D-LC和（或）离子迁移率等额外的分离方法，去除可与目的产物共洗脱的多肽，并辅以数据依赖性采集或非数据依赖性采集来提高分离效率。不过，2D-LC的循环时间可能很长，该方法对小于10 ppm的低水平HCP不够敏感。另一策略主要聚焦于样品制备过程，通过使用亲和纯化、有限消化等方法去除样品中的目的产物，或通过使用多克隆抗体捕获和富集HCP。

百泰派克生物科技提供生物制药分析服务，其中包括宿主蛋白残留（HCP）分析服务。百泰派克生物科技具有经验丰富的技术人员，可以提供从实验设计、样品检测、数据分析等全套专业服务，可精准检测生物药物可能残留的宿主蛋白。