质谱分析蛋白质磷酸化

蛋白质磷酸化分析的内容主要包括鉴定蛋白质是否发生磷酸化、发生磷酸化的氨基酸位点以及磷酸化水平等。目前蛋白质磷酸化分析方法很多，质谱技术凭借其高灵敏度、高精确度等优势已成为研究蛋白质修饰以及蛋白质相互作用等的关键技术。

由于磷酸化蛋白质在生物样本中丰度较低，利用质谱技术进行蛋白质磷酸化分析前需要对磷酸化蛋白进行富集从而提高其丰度。将蛋白酶切后通过亲和色谱（IMAC）、磷酸化抗体或TiO₂等富集方法对磷酸化肽段进行富集，然后对单磷酸化和多磷酸化肽段进行分步分离，再分别进行串联质谱分析，最后利用质谱数据结合生物信息学分析，实现磷酸化蛋白质的定性和定量分析。

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