蛋白相对定量
蛋白相对定量是一种基于质谱的定量技术,旨在比较不同样品中蛋白质的相对丰度,解析生物体在不同条件下蛋白质的表达差异,揭示蛋白质在生物过程中的作用。常用的蛋白相对定量方法有SILAC(细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记)、iTRAQ(相对定量和绝对定量等压标签)和TMT(串联质量标签)等,它们通过对蛋白质进行酶切、同位素标记、分离和质谱检测等步骤实现蛋白质组的相对定量。
百泰派克生物科技BTP基于Thermo Fisher的Orbitrap Exploris 240质谱平台结合nanoLC-MS/MS纳升色谱的蛋白相对定量服务,采用多种相对定量技术,如同位素标记法(如SILAC、TMT、iTRAQ)、非标记法(如SWATH-MS、DDA)等,精确比较不同实验条件下或生物样本中的蛋白质表达量,确定蛋白质水平的变化,旨在帮助客户快速、准确地评估蛋白质表达水平的差异,从而揭示生物过程、疾病发生和药物治疗的分子机制。
百泰派克生物科技BTP蛋白相对定量的流程
1.样品准备:
根据项目需求,采用合适的方法从不同生物样品中提取蛋白质,进行纯化和浓缩并进行质量评估,确保样品满足实验要求。
2.蛋白质酶解:
选择多种酶对纯化的目标蛋白进行酶解,将蛋白质分解成肽段以进行后续的质谱分析。
3.同位素标记:
使用SILAC、iTRAQ或TMT等同位素标记方法对肽段进行标记。
4.肽段分离:
使用高效液相色谱(如反相高效液相色谱,RP-HPLC)对肽段进行分离。
5.质谱分析:
使用高分辨质谱仪对分离的肽段进行检测和分析,获取肽段的质量和荷质比等信息等质谱数据。
6.数据分析:
使用专业的生物信息学软件分析质谱数据,鉴定蛋白质并进行相对定量分析,比较不同条件下蛋白质表达的差异,找出显著差异的蛋白质。
我们的技术优势
1.高通量数据获取:
采用先进的Orbitrap Exploris 240质谱仪器,实现高灵敏度、高分辨率的蛋白质检测,确保大量蛋白质数据的快速获取。
2.精确的定量分析:
利用高效的数据处理流程和软件,对蛋白质表达量进行准确、可靠的定量分析。
3.高灵敏度:
具有较高的灵敏度,能够检测到低丰度蛋白质。
4.广泛适用性:
适用于多种生物样品,包括细胞、组织和生物体液等,可用于研究多种生物过程。
5.定制化分析方案:
根据项目需求,为客户提供定制化的实验设计、样品处理、数据分析等一站式服务。
蛋白相对定量技术的主要应用
1.基因表达调控研究:
通过比较不同条件下蛋白质表达差异,研究基因表达受到的转录后调控、翻译后修饰等影响。
2.信号传导途径研究:
通过定量分析信号分子在不同条件下的蛋白质表达差异,揭示信号传导途径的激活和抑制机制。
3.比较蛋白质组学研究:
通过比较不同物种或亚型的蛋白质表达差异,探讨物种间或种内的遗传变异、进化关系和功能差异。
4.蛋白质互作网络研究:
通过定量蛋白质表达差异及相关性,揭示蛋白质之间的相互作用关系,构建蛋白质互作网络。
5.疾病诊断与分子机制研究:
通过比较正常和病变样品的蛋白质表达差异,发现潜在的疾病相关生物标志物,深入研究疾病发生的分子机制。
关于样品
样本类型 |
细胞 |
组织 |
生物体液 |
纯化蛋白 |
样本数量 |
10^6-10^7个细胞 |
10-100mg |
10-200ul |
10-50 ug |
中/英文项目报告
在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关的质谱参数(中英文)
3. 蛋白相对定量详细信息
4. 质谱图片
5. 原始数据
蛋白相对定量一站式服务
您只需下单-寄送样品
百泰派克一站式服务完成:样品处理-上机分析-数据分析-项目报告
相关服务
TMT/iTRAQ/MultiNotch定量蛋白组学分析
基于TMT的蛋白质组学分析
基于SILAC/Dimethyl标记的定量蛋白组分析
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