结合疫苗载体蛋白二硫键分析
结合疫苗又称为偶联疫苗，是一种使用载体蛋白来携带抗原的疫苗。载体蛋白可以是病毒样颗粒（VLPs）、细菌样颗粒（BLPs）或其他蛋白质纳米颗粒。这些载体蛋白可以通过基因工程技术在表达系统中产生，并且具有自组装的能力，形成具有抗原特异性的颗粒结构。在结合型疫苗中，抗原会与载体蛋白相结合，形成稳定的复合物。这种复合物能够激活免疫系统并诱导特异性免疫反应。在这种疫苗中，载体蛋白的结构和稳定性对疫苗的效果有重要影响。其中，二硫键是维持蛋白质三维结构的关键因素，可以增强蛋白质的稳定性和耐受性，对于控制疫苗质量和增强疫苗效果具有重要作用。
蛋白质二硫键分析的大体思路如下：首先将样品蛋白水解为肽段混合物，这个过程中要避免二硫键发生重排或交换，然后对肽段混合物进行分离、鉴定，再断开肽链中的二硫键并与整个氨基酸序列进行比对，以此推断二硫键在肽段中的位置。目前常用的检测二硫键的方法包括非片段法的X射线晶体衍射法、多维核磁共振波谱法等以及片段法的对角线电泳法、Edman降解法、氨基酸序列分析法和基于质谱的检测方法。
生物制品表征二硫键分析示意图
质谱技术检测范围广、分辨率高、准确度好、分析速度快，已广泛运用于蛋白二硫键的分析检测。利用高效液相串联质谱可以对单个或混合体系中的蛋白质二硫键进行检测、以及定位定量分析。由于二硫键容易还原而断裂，因此在提取分离蛋白质时要严格控制实验条件，避免原有的二硫键断裂或发生错配。
百泰派克生物科技（BTP），采用ISO9001认证质量控制体系管理实验室，获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务。我们基于高分辨率质谱技术提供结合疫苗载体蛋白二硫键分析一站式技术服务，结合多年的实验经验，提供高水平的针对结合疫苗载体蛋白的二硫键分析解决方案，包括阻断蛋白质二硫键体外交换、保持其天然结构的样品制备方法，二硫键交联肽段的质谱分析方法，以及配套的二硫键鉴定pLink-SS软件分析，能够实现二硫键连接及自由硫基分析，欢迎免费咨询！
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