蛋白泛素化检测
泛素化修饰是蛋白质的一种重要的翻译后修饰,几乎参与了细胞的各个生命活动,因此对蛋白泛素化检测进行检测是很重要的。百泰派克生物科技提供基于质谱的蛋白泛素化检测服务。
蛋白质泛素化
蛋白质泛素化是蛋白质的一种翻译后修饰形式。泛素是一种存在于真核生物大多数组织中的小的(8.6 kDa)调节蛋白。通过酶的作用,将泛素添加至底物蛋白的过程称为蛋白质的泛素化。该过程包含三个主要步骤:激活、结合和连接,每个步骤分别由泛素激活酶(E1s)、泛素结合酶(E2s)和泛素连接酶(E3s)作用。蛋白质泛素化修饰可以是单个泛素(单泛素化)或泛素链(多泛素化)修饰。与磷酸化修饰一样,泛素化修饰也是可逆的,泛素蛋白可以由去泛素化酶(DUB)去除掉。泛素-蛋白酶体系统介导真核生物中80%-85%的蛋白质降解。此外,泛素化还参与几乎所有生命活动,包括细胞周期调控、转录调控、信号传递、损伤修复和炎症免疫等。
蛋白泛素化检测
蛋白质泛素化检测是检测蛋白质是否发生了泛素化、哪个位点发生了泛素化,以及对泛素化蛋白进行定量。检测蛋白质的泛素化可以利用western blot、免疫共沉淀和质谱等技术进行。其中,质谱通过检测蛋白质酶切肽段的质量,可以检测出蛋白质是否发生了泛素化,二级质谱信息可以得到泛素化发生的位点,通过质谱峰强弱等信息还可实现泛素化蛋白质的定量。
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