Pull-down靶蛋白质谱鉴定

在生物体的生命活动中，蛋白质的功能是通过蛋白质与蛋白质之间的相互作用来实现的。因此，研究新的蛋白互作可以为研究蛋白质的潜在功能提供新的方向。在诸多蛋白互作鉴定实验中，Pull-down常用于体外蛋白互作检验，以及帮助发现新的互作蛋白。Pull-down实验利用高度纯化且富集的诱饵蛋白捕获在细胞中相互作用较弱或丰度低的靶蛋白，大幅度提高发现新靶蛋白的效率。Pull-down实验的具体步骤为：表达纯化GST、polyHis或Biotin标记的诱饵蛋白，使用固定化亲和配体将诱饵蛋白与固相基质稳定结合，再将诱饵蛋白与待测细胞裂解液进行混合孵育，在这一过程中，诱饵蛋白与目标蛋白相互作用并结合在一起，通过清洗除去非特异性结合的杂蛋白，即可获得与诱饵蛋白相互作用的目标蛋白，再通过质谱分析对目标蛋白进行鉴定。

百泰派克公司利用进口的GST pull-down试剂盒，能够快速准确的完成蛋白互作实验，结合公司先进的UPLC-MS质谱平台，推出基于pull down的蛋白分析一站式技术服务，灵敏度高、分辨率准确。我们既可以为您pull down实验后的蛋白样品进行检测，也可以您寄来样品，我们从pull down实验到样品质谱分析一站式解决。您只需要将您的需求和样品寄给我们，我们会负责项目后续所有事宜，包括样品前处理、pull down、质谱分析、质谱原始数据分析。

Pull-down蛋白质鉴定流程

Pull-down蛋白质鉴定流程

关于样品

1D SDS PAGE /2D PAGE gels样品：
1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby以及Silver stain样品均可进行蛋白的鉴定试验；
2. 银染的样品有可能与后续的质谱分析不兼容，我们推荐您使用下面的产品或者实验步骤进行银染实验：
ProteoSilver Plus, Sigma (Product # PROTSIL1 or PROTSIL2)
Dodeca Silver Stain, BioRad (Product # 161-0481 or 161-0480)
3. 银染的样品请不要进行脱色处理

液体样品（In solution format）：
1. 如果您洗脱的样品需要跑胶，请按照1D SDS PAGE样品准备要求准备样品即可；
2. 假如样品中蛋白量＞10ug，我们对样品的缓冲体系没有要求；
3. 假如样品中蛋白量＜10ug，样品准备过程中尽量减少SDS等表面活性剂的使用，并注意降低盐浓度；
4. 提交样品过程中，请同时提供样品的缓冲体系和样品中蛋白的预估含量；
样品运输：
我们推荐您将样品冻干后进行运输，冻干样品中蛋白非常稳定；
液体样品推荐干冰运输，短途运输冰袋也可以；
注意：
利用质谱进行蛋白样品的鉴定，在样品准备过程中需佩戴手套和头套，尽量避免自身角蛋白（keratin）对样品的污染。

中/英文项目报告

在技术报告中，百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告，报告包括：

1. 实验步骤（中英文）
2. 相关的质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 鉴定的蛋白质详细信息