蛋白质打LC-MS的参数条件一般怎么设置

    蛋白质的液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析时,参数设置取决于样品特性和分析目的。常见的参数设置如下,可以供您参考:


    1.色谱条件

    • 柱子类型:C18反相色谱柱。柱长一般在15-25 cm,内径2.1 mm,粒径3-5 µm。
    • 流动相:A相:水+0.1%甲酸或三氟乙酸。B相:乙腈+0.1%甲酸或三氟乙酸。
    • 流速:通常为300 µL/min。
    • 柱温:通常设定在40°C。
    • 梯度洗脱:从5% B相开始,逐渐增加到95% B相,时间范围大约60分钟。
    • 进样量:通常为10 µL。

    2.质谱条件

    • 离子源:ESI离子源。源温度200°C,喷雾电压3 kV。
    • 分析模式:全扫描模式:m/z 400-1600。或MS/MS模式,碰撞能量根据肽段和蛋白质的特性调整。
    • 质量范围:通常覆盖m/z 400至1600。
    • 碰撞能量:如果进行MS/MS,通常设置在20-35 eV。
    • 气体流量:喷雾气体流量为10-15 L/min。
    • 检测器:通常使用高灵敏度或高分辨率模式。

    注意,这些参数的具体设置将根据所使用的仪器、样品的性质、以及实验的具体目标而有所不同。在实际操作中,可能需要根据实验结果进行优化和调整。


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